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体视显微镜能看到构造布局吗?

对构造布局的体积;在冰冻牢固时,请求体视显微镜所阐发的构造或细胞在极短的时候由37℃降至一80℃以下。是以构造块不能像在制备超薄切片标本,出格是为戊二醛牢固所请求的那种巨细普通来讲,徕卡显微镜的人们用分手的细胞(如血细胞),或体视显微镜分手的细胞(如心肌细胞)或培育细胞。举比方下,日人铃木研讨骨骼肌缩短与舒张时C8a 在质网中的开释与摄取进程和Cat十在肌质网中的活动路子,他分手蛙胖肠肌单根肌纤维(即骼肌细胞),赐与电安慰后在差别时相将其冰冻牢固。体视显微镜固然也能够将构造块间接冰冻牢固,但体积要相称小,保障构造块中大局部细胞(首要是周围的细胞)能保管好而无冰晶构成。一个很是主要的题目是在取材和分手细胞进程中必须非常细心,体视显微镜毫不能毁伤待察看阐发的细胞。因为作X线徽区阐发岂但步骤单一,奥林巴斯显微镜并且本钱甚高,若是颠末长时候及多步骤的处置后,所阐发的细胞是受毁伤的细胞或死细胞,体视显微镜得犯错误的论断是很是遗憾的.如颠末胶元酶处置分手出的心肌细胞有两种形状,一种是长杆状,排挤台盼蓝;一种是圆形,用台盼蓝染色时着蓝色.后者是在细胞分手进程中受毁伤的濒死细胞。这体视显微镜两种细胞中电解质的含量及散布非常差别。圆形心肌细胞中Na 甚高而K 极低,线粒体中的Caz十浓度非常高(25Ummol/kgdryweight),颠末与别的阐发方式查对,证实圆形细胞高Na 低K 及线粒体内高Ca2 是因为在细胞分手进程中细胞膜受毁伤的成果。



体视显微镜细胞及构造的冰冻牢固方式经常是先采用碎冷牢固(quench-freeze),而后放入液氮中保管。碎冷牢固对保管的结果非常主要。体视显微镜活细胞或新颖构造中富含水份,偏鲜明微镜当淬冷时经常是细胞或构造与碎冷剂(出格是用液氮碎冷时)间接打仗的部位先冷冻牢固,是以构成一个“壳”,体视显微镜便故障了细胞的中间部位碎冷牢固。是以体视显微镜在作X-线微区阐发时,经常发明较大的细胞的中间部位有冰晶存在。


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